在《免疫检测的原理和信号放大》一文中，我们详细介绍了免疫检测中信号放大的基本原理。二抗是用于检测和放大一抗信号的抗体，它能够特异性地结合一抗，从而在免疫化学实验中起到关键作用。

二抗能够识别与目标靶标结合的一抗，主要用于进行间接检测。良好的一抗-二抗配对能够获得高信号、低背景噪音的数据结果。

二抗的制备一般是通过用来自其他物种的抗体对宿主动物进行免疫接种而产生。例如，山羊抗兔IgG二抗是通过用兔IgG抗体对山羊进行免疫接种来产生的。根据生产方法的不同，二抗可以识别同一类别的所有一抗（例如 IgG、IgA 或 IgM）或仅识别特定亚类的抗体（例如 IgG1、IgG2a 或 IgA1），还可以开发二抗来识别某些类型的抗体轻链（κ或λ）。

二抗的选择包括许多因素的考量，包括一抗特性、样品、应用以及检测技术。高性能的二抗可以显著提高数据质量，以高灵敏度和特异性与一抗结合，从而支持一抗的性能。

二抗需要与一抗的恒定区结合，并且恒定区的顺序因物种而具有差异，因此在使用的时候需要选择针对一抗宿主物种的二抗。例如，如果一抗是在小鼠中产生的，那么就需要抗小鼠二抗。

由于二抗应与一抗的恒定区结合，而恒定区的序列取决于一抗的同种型，因此您需要选择针对一抗同种型的二抗。例如，如果一抗是小鼠 IgM，那么需要对小鼠 IgM 具有特异性的二抗，即抗小鼠 IgM。或者，如果一抗多克隆抗体的同种型是兔 IgG，那么需要选择对兔 IgG 具有特异性的二抗（抗兔 IgG）。通常使用与 IgG 的重链和轻链以及其他免疫球蛋白的轻链反应的抗兔 IgG （H+L）。

•  免疫球蛋白类别 - IgG、IgM、IgA、IgD、IgE

•  小鼠免疫球蛋白亚类 - IgG1、IgG2a/IgG2c、IgG2b、IgG3

•  人免疫球蛋白亚类 - IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、IgA2

•  大鼠免疫球蛋白亚类 - IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c

•  仓鼠免疫球蛋白亚类 - IgG1、IgG2、IgG3

•  轻型链条 - Kappa、Lambda

•  重链 - IgG（γ/γ）、IgM（mu/μ）、IgA（α/α）、IgD（δ/δ）、IgE（ε/ε）

为了尽量减少二抗的任何非特异性、背景结合和交叉反应性，我们建议选择与样品来源的物种交叉吸附/预吸附的二抗。例如，如果样品是人体组织，那么需要选择与人免疫球蛋白 （Ig） 或血清蛋白 （SP） 交叉吸附的二抗，这将有助于确保该二抗与人体组织的交叉反应性更小。

在某些情况下，我们需要考虑使用抗体片段（F (ab') 2 或 Fab）的二抗。

除了全分子的二抗，SouthernBiotech 还生产仅为F（ab'）2 或 Fab 片段的二抗。抗体片段的二抗适用于特定情况，包括：

•  免疫组织化学或类似检测，其中二抗需要渗透到组织中。由于 F（ab'）2 和 Fab 二抗的尺寸较小，因此与全分子抗体相比，它们可以更深入地进入组织。

•  含有 Fc 受体的样品。由于 F（ab'）2 和 Fab 二抗缺乏 Fc 区，因此它们的使用会导致含有 Fc 受体的样品中的非特异性结合和背景减少。

检测二抗的方法有很多种，偶联物的选择取决于不同类型的检测技术。对于蛋白质印迹和 ELISA 应用，通常使用辣根过氧化物酶 （HRP） 和碱性磷酸酶 （AP） 等酶偶联二抗，这两种抗体都可以使用比色和化学发光平台进行检测。还有一些读板机和成像仪可以检测与荧光染料偶联的二抗（例如，Alexa Fluor®、FITC、TRITC、APC、PE）。

对于流式细胞术或免疫荧光应用，需要与荧光染料偶联的二抗。

1、同种型：Goat IgG

2、同型对照：Goat IgG-UNLB

3、特异性：与人 IgG 的重链反应

4、来源：来自人 IgG 进行超免疫山羊的混合抗血清

5、交叉吸附：人 IgM 和 IgA;恒河猴 （Macaca mulatta） 和食蟹猴 （Macaca fascicularis） IgG；可能与其他物种的 IgG 反应

6、纯化方法：对与琼脂糖共价连接的人 IgG 进行亲和层析，Affinity chromatography on human IgG covalently linked to agarose

7、共轭：UNLB (Unconjugated)

8、缓冲液配方：硼酸盐缓冲盐水，pH 8.2

9、克隆性：多克隆

10、浓度：1.0 mg/mL

11、体积：1.0 mL

12、储存条件：2-8°C

13、用途：ELISA、免疫沉淀

14、RRID 编号：AB_2795694

•  产品名称：Goat Anti-Human IgG, Monkey ads-HRP，山羊抗人 IgG，猴子 ads-HRP

•  产品描述：山羊抗人 IgG-HRP 抗体，对恒河猴和食蟹猴蛋白的反应性最小，用于 ELISA 检测

1、同种型：Goat IgG

2、同型对照：0109-05

3、特异性：与人 IgG 的重链反应

4、来源：来自人 IgG 进行超免疫山羊的混合抗血清

5、交叉吸附：人 IgM 和 IgA;恒河猴 （Macaca mulatta） 和食蟹猴 （Macaca fascicularis） IgG；可能与其他物种的 IgG 反应

6、纯化方法：对与琼脂糖共价连接的人 IgG 进行亲和层析

7、共轭：HRP（辣根过氧化物酶）

8、缓冲液配方：50% 甘油/50% 磷酸盐缓冲盐水，pH 7.4

9、克隆性：多克隆

10、体积：1.0 mL

11、储存条件：2-8°C

12、用途：ELISA、免疫沉淀

13、RRID 编号：AB_2795696

SouthernBiotech创立于1982年，总部位于美国，致力于高质量、高亲和度二抗的生产、纯化和标记。同时，SouthernBiotech还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体，其中还包括荧光素和酶标记物，低内毒素/不含叠氮化物（LE/AF）制剂，F(ab)和F(ab')2片段化抗体。