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IVT mRNA 合成面临太多挑战?RNAutomation 自动化平台为您保驾护航
来源: 2025-09-18 5


写在前言



mRNA(Messenger RNA,信使RNA)是一种可以将DNA中的基因信息传递到蛋白的“桥梁”,在2020年新冠疫情爆发时期,mRNA疫苗发挥了重要作用。mRNA疫苗是一种新型且新兴的生物学技术,可以通过静脉注射递送给患者,然后利用患者的肝脏作为体内蛋白质生产的工厂,在人体内引起显著的抗病毒免疫应答。


mRNA疫苗(注:图来自网络)

01


mRNA疫苗原理及优势

mRNA疫苗通过将携带特定抗原蛋白编码信息的mRNA分子导入人体细胞内。这些mRNA分子在细胞内被翻译成相应的抗原蛋白,从而诱发人体免疫系统产生针对该抗原的中和抗体和T细胞免疫应答。

   

与传统疫苗相比,mRNA疫苗优势:


  • 无需培养病毒或蛋

  • 研发周期短

  • 产能扩张快

  • 安全性较高


02


mRNA疫苗的构建过程

体外转录IVT是最常见的mRNA合成方法之一,以线性化的DNA模板为基础,在T7聚合酶等酶的作用下,将DNA模板转录为mRNAmRNA疫苗的构建包括线性化质粒DNA模板、体外转录、加帽、加尾polyA)、纯化、形成LNPs、筛选、疫苗制备这8个过程。今天,我们将重点介绍先前面几个mRNA的合成与纯化过程。
  • 线性化质粒DNA模板:首先,需要提取目标DNA,构建携带目标抗原蛋白基因的质粒,然后通过限制性内切酶将质粒酶切进行线性化,为后续的mRNA合成提供理想的模板。

  • 体外转录:利用T7 RNA聚合酶,在体外以线性化DNA模板合成mRNA

  • mRNA加帽:在加帽酶的作用下,在RNA进行5’端加帽(包括Cap0Cap1帽子结构),以提高mRNA的稳定性和翻译效率。

  • mRNA加尾:RNA进行3’端聚腺苷酸加尾,以提高mRNA的稳定性和翻译效率

  • 纤维素纯化:基于纤维素膜或者纤维素珠对mRNA进行纯化,去除dsRNA等杂质。



Abnova mRNA 体外转录(IVT)示意图

然而,传统的mRNA手动合成和纯化方法因mRNA固有的不稳定性、易降解性、杂质污染以及产量和质量上的差异而受到挑战,限制了其在治疗性抗体以及疫苗、免疫治疗、基因治疗和基因编辑中的应用。

AbnovaRNAutomation™是一种完全集成的自动化系统,配备硬件模块、强大的软件和预先验证的生物试剂、试剂盒和塑料耗材,可以有效地解决mRNA的挑战,实现了mRNA从转录到纯化的全自动化,确保了下游应用中mRNA分析的一致性,是下一代mRNA疫苗开发、生物制品生产、免疫治疗以及细胞和基因治疗需求的强大平台。

                                        合成平台图.jpg   

RNAutomation mRNA自动化合成平台示意图

Abnova RNAutomation™ 基于 Opentrons Flex 平台构建,集成5大硬件模块:热循环仪器、温度模块、摇床加热器、磁块、真空歧管,能够实现可扩展的生产流程,并在过程中进行质量控制。Abnova基于该平台,预先验证软件并提供合成纯化试剂盒,可实现关键流程的自动化,包括IVT、加帽、寡核苷酸 dT 和纤维素纯化,提供标准化且可靠的RNA生产工作流程。

此外,Abnova提供SAMmRNAcircRNA的合成纯化服务,通过自动化优势,高效、准确、减少人工操作带来的污染和误差,提高试验结果可靠性和可重复性,为您的RNA合成保驾护航。

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