原位杂交(ISH)是一种强大的分子技术,用于检测和可视化细胞和组织内的特定核酸序列。这种方法在诊断、研究和个性化医疗中发挥着关键作用,使科学家能够在细胞水平上分析基因表达、染色体异常和病原体检测。ISH技术主要分为荧光原位杂交(FISH)检测和显色原位杂交(CISH)检测,每种技术都为各种应用提供了独特的优势。
荧光原位杂交 (FISH) 检测
FISH使用荧光标记的探针,这些探针与目标核酸序列结合,通过荧光显微镜进行可视化该技术具有高灵敏度,能够通过不同的荧光染料检测多个目标序列。
FISH应用于癌症诊断、产前遗传检测和神经疾病研究,凭借高灵敏度和空间分辨率的优势在研究及临床诊断中具有不可或缺的优势。除了传统的FISH探针,mutaFIS将挂锁探针技术与滚环扩增(RCA)相结合,能够在单核苷酸分辨率下进行原位、单细胞和单分子RNA突变检测,从而扩展了FISH在高级分子分析中的能力。
FISH优势
• 高灵敏度和特异性:以高准确性检测低丰度的核酸序列
• 多重检测能力:允许使用不同荧光染料同时检测多个目标
• 空间分辨率:提供细胞和组织内目标序列的详细空间定位
• 定量分析:实现荧光强度的定量测量
• 实时可视化:使用先进的光学显微镜在活体细胞中实现实时观察
显色原位杂交 (CISH) 检测
CISH使用酶标记的探针,当与目标序列结合时产生有色沉淀,利用明场显微镜进行可视化。与FISH不同,CISH允许永久染色,使其成为常规病理工作流程的理想选择,广泛应用于组织病理实验室,与标准显微镜兼容,易于解释,且成本效益高。
CISH常见应用包括检测非整倍体、识别基因异常、检测病原体病毒、分析miRNA、支持准确诊断和个性化治疗方案。
CISH优势
• 永久染色:允许长期储存和重新检查玻片,信号不会褪色。
• 成本效益高:由于设备和维护成本较低,因此更经济实惠。
• 易于解释:彩色沉淀物易于区分,简化了分析流程。
• 清晰的组织形态:在杂交信号旁边提供组织结构的清晰可视化
基因FISH探针
即用的双色FISH探针,这是具有不同颜色位点的特异性荧光素标记探针,可以产生不同的荧光信号,在荧光显微镜下进行可视化后,用于识别特定基因的扩增或基因丢失。
适用样本类型
• 细胞 • 中期扩增 • 冷冻切片 • FFPE
Abnova亚诺法提供各种类型的ISH探针类型,包括用于研究基因扩增.基因丢失,分体式双色FISH以及易位双色FISH探针。