来源：
2024-10-28
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2024年诺贝尔生理学或医学奖表彰小分子核糖核酸microRNA的重要发现，奠定了microRNA 及其在转录后调控中的关键作用。Abnova提供上百种疾病miRNA靶标产品，可以基于原位杂交检测miRNA及其空间定位，产品具有高稳定性、高特异性、高灵敏性、高亲和力的特点。
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活动产品：Abnova miRNA系列产品
活动时间：即日起-2024年12月31日
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10月7日，美国科学家维克托·安博斯（Victor Ambros）与加里·鲁夫昆（Gary Ruvkun）被授予2024年诺贝尔生理学或医学奖”，以此表彰他们对小分子核糖核酸（microRNA，缩写miRNA）的重要发现，肯定了microRNA 及其在转录后基因调控中的关键作用。
图1：Victor Ambros和Gary Ruvkun
（图片来源：诺贝尔奖官网）
什么是 MicroRNA?
MicroRNAs（miRNA）是20-25个核苷酸的小分子非编码RNA，它们通过与mRNA分子内的互补序列配对来介导RNA沉默和基因表达的转录后调控。
miRNA作为各种生理活动的调节因子，从代谢、细胞增殖、分化到细胞死亡都有其调控作用。
MicroRNA 合成过程
01
RNA聚合酶II转录miRNA基因，导致形成名为初级miRNA（pri-miRNAs）的长转录本，这些转录本包含由数百个核苷酸组成的茎环结构；
02
初级miRNA在细胞核中被一个由RNase III酶Drosha和蛋白DiGeorge综合征关键区域基因8（DGCR8）组成的微处理器复合体切割，从而释放出大约70个核苷酸的发夹前体miRNA（pre-miRNAs）；
03
前体miRNA通过由exportin-5（XPO5）组成的穿梭系统被运输到细胞质中，并在另一个RNase III酶Dicer的作用下形成20-25个核苷酸的双链RNA；
04
从双链miRNA中切割出的单链RNA被运输并组装到由Argonaute（AGO）蛋白组成的蛋白复合体中，形成RNA诱导的沉默复合体（RISC）。在大多数情况下，RISC与目标基因mRNA的3'-非翻译区（3'-UTR）结合，以指导RNA沉默。
miRNA检测方法：MicroRNA 原位杂交
miRNA 原位杂交是一种强大的技术，使研究人员能够可视化和定位细胞和组织内的 miRNA。它基于杂交原理，其中互补探针特异性结合靶 miRNA，使其能够检测和空间定位。
用于检测 microRNA （miRNA）
在异质细胞群中通过空间和形态背景可视化基因调控
通过显色底物或荧光进行检测
miRNA ISH 工作流程
miRNA ISH（原位杂交）的流程概括为以下几个主要步骤：
1. 样本准备（Preparation）
● 选择样本类型：新鲜冷冻（Fresh frozen）或固定冷冻（Fixed frozen）样本，以及培养的细胞（Cultured cells）。
2. 杂交（Hybridization）
● 将切片固定在玻片上；
● 进行预杂交处理，以减少非特异性结合；
● 使用标记的miRNA探针与杂交液混合，滴加到切片上；
● 在特定的温度和条件下进行过夜孵育。
3. 检测（Detection）
● 使用特定的抗体和酶标记来检测杂交信号；
● 通过显色底物的发展来可视化信号。
4. 可视化（Visualization）
● 使用显微镜观察切片，并记录miRNA的表达模式和强度；
● 分析miRNA在不同细胞类型或组织区域中的分布情况。
miRNA ISH 的应用
1. 基础研究
● miRNA 表达研究：miR-21、miR-124、miR-155、miR-206
● 发育生物学：miR-430、miR-1、miR-196
● 癌症研究：Let-7、miR-21、miR-155、miR-34a
● 细胞信号传导：miR-221、miR-222、miR-17-92 簇
● 免疫调节：miR-146a、miR-155、miR-181a
2. 临床应用
● 癌症诊断和预后：miR-21、miR-155、miR-34a、miR-10b
● 癌症治疗：miR-34a、miR-122、miR-155、Let-7
● 神经系统疾病：miR-9、miR-124、miR-132、miR-133
● 心血管疾病：miR-1、miR-133、miR-21、miR-126
● 代谢性疾病：miR-122、miR-33、miR-143、miR-155
Abnova miRNA 解决方案
Abnova miRNA 探针是地高辛标记探针，提供了一种通过显色原位杂交研究 miRNA 在 FFPE 组织中的分布的实用方法。
Abnova miRNA 探针的优势
01
涵盖100+ 发病机制、肿瘤发生和癌症转移疾病相关 miRNA 靶标；
02
高稳定性、高特异性、高灵敏度、高亲和力；
03
提供各种 FFPE 组织样品的阳性和阴性数据；
04
可以同时观察组织形态和 CISH 信号；
05
无需荧光显微镜。
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